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酶聯(lián)免疫試劑盒的基本原理有三條
更新時(shí)間:2021-12-24   點(diǎn)擊次數(shù):1503次
   酶聯(lián)免疫試劑盒的免疫分析是一種利用特定抗體與抗原或半抗原發(fā)生的高選擇性高特異性識(shí)別和結(jié)合原理,對(duì)待測(cè)抗體或者抗原進(jìn)行分析測(cè)定的方法,酶聯(lián)免疫吸附分析是免疫分析的一種,分三個(gè)部分組成:免疫識(shí)別,信號(hào)輸出和數(shù)據(jù)處理。
  
  步驟:免疫識(shí)別是在聚苯乙烯制成的96孔板上包被抗體,而后利用抗體識(shí)別待測(cè)的抗原(通常是疾病的蛋白質(zhì)生物標(biāo)記物,病毒,細(xì)菌等等,從復(fù)雜待測(cè)液中將抗原吸附到96孔板表面。接著用帶有辣根過(guò)氧化酶(HorseradishPeroxidase,HRP)、熒光或放射性標(biāo)記的抗體通過(guò)直接或者間接的方式輸出識(shí)別信號(hào)。后利用信號(hào)強(qiáng)度,標(biāo)準(zhǔn)樣品濃度梯度等信息計(jì)算得出待測(cè)樣中目標(biāo)抗原的濃度。
  
  酶聯(lián)免疫試劑盒的基本原理有三條:
 ?。?)抗原或抗體能以物理性地吸附于固相載體表面,可能是蛋白和聚苯乙烯表面間的疏水性部分相互吸附,并保持其免疫學(xué)活性;
  (2)抗原或抗體可通過(guò)共價(jià)鍵與酶連接形成酶結(jié)合物,而此種酶結(jié)合物仍能保持其免疫學(xué)和酶學(xué)活性;
  (3)酶結(jié)合物與相應(yīng)抗原或抗體結(jié)合后,可根據(jù)加入底物的顏色反應(yīng)來(lái)判定是否有免疫反應(yīng)的存在,而且顏色反應(yīng)的深淺是與標(biāo)本中相應(yīng)抗原或抗體的量成正比例的,因此,可以按底物顯色的程度顯示試驗(yàn)結(jié)果。
  
  由于ELISA法一方面是建立在抗原與抗體免疫學(xué)反應(yīng)的基礎(chǔ)上,因而,具有特異性。而另一方面又由于酶標(biāo)記抗原或抗體是酶分子與抗原或抗體分子的結(jié)合物,它可以催化底物分子發(fā)生反應(yīng),產(chǎn)生放大作用,正因?yàn)榇朔N放大作用而使本法具有很高的敏感性。因此,ELISA法是一種既敏感又特異的方法。
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