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操作細(xì)胞后正確處理的方法
更新時(shí)間:2021-07-28   點(diǎn)擊次數(shù):1983次

細(xì)胞活化︰ 

1.收到細(xì)胞株包裹時(shí),請檢查細(xì)胞株冷凍管是否有凍結(jié)情形,若有請當(dāng)即告訴。細(xì)胞株請盡速開始培育,或當(dāng)即冷凍保存(置于–70 °C,隔夜后,移到liq N2)。 


冷凍細(xì)胞凍結(jié)程序: 

1. 根據(jù)細(xì)胞株數(shù)據(jù)單zhi定之基礎(chǔ)培育基種類、血清種類和其它zhi定之成份和份額,制備培育基。絕大多數(shù)之細(xì)胞均無法當(dāng)即適應(yīng)不同之基礎(chǔ)培育基或不同之血清種類,若因試驗(yàn)需要,有必要有所不同時(shí),必須以緩慢份額漸次改變培育基組成,確定細(xì)胞適應(yīng)后,方進(jìn)行所需之試驗(yàn)。 


2. FBS (fetal bovine serum, 胚牛血清), CS (calf serum, 小牛血清)和HS (horse serum, 馬血清),對細(xì)胞而言差異極大,請必須根據(jù)細(xì)胞株資料單zhi定之血清種類培育之。 


3. 將培育基置于37 °C 水槽中回溫,回溫后噴以70 % 酒精并擦拭之,移入無菌操作臺內(nèi)。取出冷凍管,當(dāng)即放入37 °C 水槽中快速凍結(jié),水面高度不行接近或高過冷凍管之蓋沿,否則易產(chǎn)生污染。輕搖冷凍管使其在1 分鐘內(nèi)悉數(shù)融化后,以70%ethanol擦拭冷凍管外部,移入無菌操作臺。


4. 根據(jù)細(xì)胞種類和濃度,于無菌操作臺內(nèi)取10 ml培育基加至T25 或T75 flask中。取出已凍結(jié)之細(xì)胞懸浮液,慢慢參加T25或T75 flask 內(nèi)之培育基,混合均勻,放入37 °C,5 % CO2培育箱培育。 


5. 對絕大多數(shù)細(xì)胞而言,1 % 以下之冷凍保護(hù)劑DMSO,不會對細(xì)胞之貼附或活化有不良影響,不需馬上由凍結(jié).細(xì)胞中去除,待第二天確定細(xì)胞成長或貼附良好后再去除即可。


 惟對極少數(shù)因?qū)MSO 靈敏或會形成細(xì)胞分化之細(xì)胞,需當(dāng)即去除DMSO 者,則可將凍結(jié)后之細(xì)胞懸浮液放入5 - 10 ml 培育基中,離心300 xg (約1000 rpm),5 分鐘,小心移去上清液,參加適量新鮮培育基,將細(xì)胞均勻混合后,轉(zhuǎn)移至培育瓶中,再放入37 °C,5 % CO2 培育箱培育。


我司成立的初衷就定位于以人為本,以細(xì)胞品質(zhì)取勝的理念,為我們國家生命科學(xué)研究做一些力所能及的工作,做一家值得尊重并受人信賴的企業(yè)!產(chǎn)品免費(fèi)運(yùn)輸,如出現(xiàn)運(yùn)輸質(zhì)量問題,我們可以包退換貨,具有完善的庫存及供應(yīng)體系以及高效穩(wěn)定的純化技術(shù),保證產(chǎn)品均能現(xiàn)貨供應(yīng)和產(chǎn)品質(zhì)量的穩(wěn)定性。


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