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血清培養(yǎng)中出現(xiàn)小黑點是怎樣回事
更新時間:2021-01-11   點擊次數(shù):2470次

血清在培養(yǎng)基中扮演著這么多的人物,那么它在培養(yǎng)的進程中也會出現(xiàn)一些的問題,比如說:在培養(yǎng)進程中會出現(xiàn)一個個“小黑點”的現(xiàn)象,這是怎樣一回事呢?

我們一旦發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基中有黑點,我們先不要著急,也不要慌張,要搞清楚這個黑點是什么?什么構(gòu)成的?
首要,要肉眼查詢培養(yǎng)基是否混濁,然后,在鏡下查詢培養(yǎng)細胞生長的狀況,黑點是否游動等。如果細胞被污染,微生物則會很多繁衍,培養(yǎng)基就會敏捷變黃、變混濁。污染包括細菌污染、支原體污染等。如果在鏡下查詢細胞,生長狀況出色,與黑點出現(xiàn)前比較,沒有任何改變,那么,黑點的出現(xiàn)或許與以下幾種狀況有關(guān):
首要或許是細胞生長過老,破碎的細胞殘??;再有或許便是血清質(zhì)量欠好,重復(fù)凍融的效果;然后或許是制作培養(yǎng)基的pH值偏高,不宜細胞生長;其次或許是亦有或許是制作培養(yǎng)基的水質(zhì)、容器不合格(可應(yīng)用離心、過濾的方法去除這些黑點);或許是培養(yǎng)的原代細胞中出現(xiàn)小黑點(或許是原代組織中的雜質(zhì),屢次傳代能夠消除)。
那么我們怎樣防止黑點生成呢?經(jīng)過我們多年的從業(yè)經(jīng)驗,以為至少要做到以下幾點:
(1)盡或許地減少血清凍融次數(shù);
(2)培養(yǎng)基無需37℃水??;
(3)培養(yǎng)基保持PH值7.0- 7.2;
(4)嚴格控制制作培養(yǎng)基的水質(zhì),容器定時沖刷;
(5)掌握細胞傳代的機會,細胞切勿生長過老。

選擇血清時要結(jié)合專業(yè)知識,盡可能選用客觀性強的指標(biāo),在儀器和試劑允許的條件下,選用特異性強、ELISA試劑盒靈敏度高、準(zhǔn)確可靠的客觀指標(biāo),一定要事先規(guī)定讀取數(shù)值的嚴格標(biāo)準(zhǔn),只有這樣才能準(zhǔn)確地分析自己的實驗結(jié)果,從而也大大提高了自己實驗結(jié)果的可信度。

 

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