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ELISA試劑盒試驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)曲線和測定的重復(fù)性差的原因
更新時(shí)間:2017-10-13   點(diǎn)擊次數(shù):4483次

ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中,有很多新手在檢測時(shí)候遇到試驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)曲線和測定的重復(fù)性差,這是什么原因造成的?上海通蔚生物就以上問題作出具體解答,歡迎參考學(xué)習(xí)。
 

ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中常見原因如下:
a)可能原因:加樣本及試劑量不準(zhǔn);孔間不一致;
解決方法:校正移液器,吸嘴要配套,裝吸嘴時(shí)要緊密。
重復(fù)某一樣品時(shí),加樣時(shí)間盡可能與*次接近;
重復(fù)測定標(biāo)本,操作條件、人員等應(yīng)盡可能與上次保持一致,以排除這些因素造成的不一致的可能性;樣品稀釋前應(yīng)充分混勻。
b)可能原因:加樣過快,孔間發(fā)生污染;
解決方法:重復(fù)測定標(biāo)本,操作條件、人員等應(yīng)盡可能與上次保持一致,以排除這些因素造成的不一致的可能性;加樣不要過快。         
c)可能原因:加錯樣本;
解決方法:檢查記錄和試劑,是否加錯樣本。
d)可能原因:加樣本及試劑時(shí),加在孔壁上部非包被區(qū);
解決方法:加樣槍頭不要貼壁。
e)可能原因:不同批號試劑盒中組分混用;
解決方法:不同批號試劑盒中組分不可混用。
f)可能原因:溫育時(shí)間、洗板、顯色時(shí)間不一致;
解決方法:檢查時(shí)間是否一致。
g)可能原因:孔內(nèi)污染雜物;
解決方法:離心樣品,排除雜物。
h)可能原因:試劑/樣品沒有混勻;
解決方法:充分混勻樣品和試劑。
i)可能原因:血清標(biāo)本未*凝固即加入,反應(yīng)孔內(nèi)出現(xiàn)纖維蛋白凝固或殘留血    
細(xì)胞,易出現(xiàn)假陽性反應(yīng)等。
解決方法:待血清標(biāo)本*凝固后做試驗(yàn)。
 

ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)室,對試劑準(zhǔn)備一般不太注意,通常的做法是,在實(shí)驗(yàn)時(shí)將試劑從冰箱中拿出來即用,而忽略了這種做法有可能影響后面溫育時(shí)間不夠的問題,其直接的后果是對一些弱陽性標(biāo)本的檢測出現(xiàn)假陰性。上海通蔚生物代理的ELISA試劑盒預(yù)期應(yīng)用:ELISA法定量測定血清、血漿、組織勻漿或其它相關(guān)生物液體中目標(biāo)蛋白含量。

 

上海通蔚生物科技有限公司

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