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你了解多少通蔚17種ELISA試劑盒技巧呢?
更新時間:2017-08-11   點擊次數(shù):1416次

今天上海通蔚生物來告訴您ELISA試劑盒的17種操作技巧,只要您掌握了這些實驗技巧之后,ELISA試劑盒實驗入門新手學起來都會快的多。那么它有哪些技巧呢?
1.加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
2.合理安排檢測量,以免反應板過多造成洗板等待時間長。
3.吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
4.要盡量做雙孔實驗,這樣才既能保證數(shù)據(jù)的準確性,又能反映出試劑盒的精密度。
5.樣品稀釋液應用加液器加注,并經(jīng)常校對其準確性。
6.為防止樣品蒸發(fā),試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),酶標板加上蓋或覆膜。
7.未使用完的酶標板或者試劑,請于2-8℃保存。辣根過氧化物酶標記抗人IgG工作液請依據(jù)所需的量配置使用。請勿重復使用已稀釋過的辣根過氧化物酶標記抗人IgG工作液。
8.ELISA試劑盒實驗中,加樣后及時放人孵箱,標本較多時,要分批操作。按說明步驟嚴格控制操作時間,防止孵育時間人為延長,導致非特異性結(jié)合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。
9.剩余樣品及廢棄物應經(jīng)121℃高壓蒸汽滅菌30分鐘,或用5.0g/L次氯酸鈉等消毒劑處理30分鐘后廢棄。
10.人ELISA試劑盒洗滌時各孔均需加滿液體,防止孔口有游離酶不能洗凈。
11.每次實驗留一孔作為空白調(diào)零孔,該孔不加任何試劑,只是zui后加底物溶液及2N H2SO4。測量時先用此孔調(diào)OD值至零。
12.手工洗板時每次加入洗滌液后。應靜置15~30s,不要將一個酶標孑L中的洗滌液濺入另一酶標孔中,防止交叉污染。甩去洗滌液后將酶標板放在毛巾或吸水紙上拍干。
13.對樣本的結(jié)果有疑問時需要使用其他檢測方法進行驗證。
14.沒有去離子水或雙蒸水時,可以使用娃哈哈純凈水配制溶液,切勿使用自來水。
15.在使用微量加樣器時,吸取不同瓶子中液體后要更換槍頭,即使吸取標準品溶液。
16.吸取液體時速度不易太快,以免產(chǎn)生氣泡,人ELISA試劑盒吸取的量不夠準確。
17.吸取液體時要選用量程和需要量接近的微量加樣器吸,減少誤差。

 

ELISA試劑盒適用于體外定性檢測人血清或血漿中的抗人類戊型肝炎(HEV)病毒 IgM 抗體ELISA檢測。計算和結(jié)果判定:
  試驗有效性:陽性對照孔平均值≥1.00; 陰性對照平均值≤0.10
  臨界值(CUT OFF)計算:臨界值=陰性對照孔平均值+0.15
  陰性判定:樣品OD值< 臨界值(CUT OFF)者為豬大腸桿菌Igy(E.coli sIgY)陰性
  陽性判定:樣品OD值≥ 臨界值(CUT OFF)者為豬大腸桿菌Igy(E.coli sIgY)陽性

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