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ELISA試劑盒操作時(shí)的室溫應(yīng)嚴(yán)格
更新時(shí)間:2016-08-25   點(diǎn)擊次數(shù):1803次

   在實(shí)驗(yàn)條件(包括ELISA試劑盒)較難保證恒定的情況下,這種判斷法較為合適。在得出標(biāo)本(S)和陰性對(duì)照(N)的A值后,計(jì)算S/N值。也有寫(xiě)作P/N的,這里的P不代表陽(yáng)性(positive),而是病人(patient)的縮寫(xiě),不應(yīng)誤解。為避免混淆,更宜用S/N表示。在早期的間接法ELISA試劑盒中,有些作者定出S/N為陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn),現(xiàn)多為各種測(cè)定所沿用。

   實(shí)際上每一測(cè)定系統(tǒng)應(yīng)該用實(shí)驗(yàn)求出各自的S/N的閾值。更應(yīng)注意的是ELISA試劑盒,N所代表的陰性對(duì)照是不含受檢物質(zhì)的人血清。有的試劑盒中所設(shè)陰性對(duì)照為不含蛋白質(zhì)或蛋白質(zhì)含量較底的緩沖液,以致反應(yīng)后產(chǎn)生的本底可能較正常人血清的本底低得多。

   因此,這類(lèi)試劑盒規(guī),如N<0.05(或其他數(shù)值),則按0.05計(jì)算,否則將出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果。濕盒應(yīng)先放在保溫箱中預(yù)溫至規(guī)定的溫度,特別是在氣溫較低的時(shí)候更應(yīng)如此。無(wú)論是水浴還是濕盒溫育,反應(yīng)板均不宜疊放,以保證各板的溫度都能迅速平衡。室溫溫育的反應(yīng),限制在規(guī)定的范圍內(nèi),標(biāo)準(zhǔn)室溫溫度是指20-25℃,但具體操作時(shí)可根據(jù)說(shuō)明書(shū)的要求控制溫育。室溫溫育時(shí),ELISA試劑盒板只要平置于操作臺(tái)上即可。應(yīng)注意溫育的溫度和時(shí)間。為保證這一點(diǎn),一個(gè)人操作時(shí),一次不宜多于兩塊板同時(shí)測(cè)定。

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